Calculadora de diluciones seriadas
Cada tubo se prepara agregando el volumen de transferencia del tubo anterior (el tubo 1, de la solución madre) al diluyente y mezclando bien. Después de sacar la siguiente transferencia, cada tubo conserva su volumen menos esa transferencia.
Cómo funciona una dilución seriada
Una dilución seriada repite la misma dilución varias veces, y cada tubo se prepara a partir del anterior. Con un factor de dilución DF por paso, el tubo n tiene una concentración de:
Cn = C0 ÷ DFn
Para preparar cada tubo con un volumen total V: transferencia = V ÷ DF y diluyente = V − transferencia. Dividir una dilución grande en pasos es mucho más exacto que un solo paso enorme: pipetear 1 µL en 999 µL tiene mucho más error que tres pasos de 1:10.
Ejemplo resuelto
Una solución madre de 1 mg/mL, cinco pasos de 1:10 y 1,000 µL por tubo: transfiere 100 µL a 900 µL de diluyente cada vez. Los tubos contienen 0.1, 0.01, 0.001, 0.0001 y 0.00001 mg/mL, una dilución total de 1:100,000 en el tubo 5.
Una serie 1:2 (DF = 2) reduce la concentración a la mitad en cada paso: 500 µL en 500 µL. Es común en curvas estándar y pruebas de susceptibilidad a antibióticos.
Errores comunes
- No mezclar entre pasos. Mezcla bien cada tubo antes de la siguiente transferencia, o todos los tubos posteriores saldrán mal.
- Reutilizar la misma punta. El arrastre de un tubo concentrado contamina el siguiente. Cambia de punta en cada paso.
- Confundir el factor de dilución con la proporción. 1:10 significa 1 parte de muestra en 10 partes totales (1 + 9), no 1 + 10.
- Olvidar el volumen que se retira. Cada tubo pierde el volumen de transferencia al preparar el siguiente; planea los volúmenes para que a los últimos tubos les quede suficiente.
Preguntas frecuentes
¿En qué se diferencia de una dilución simple?
Una dilución simple usa C1V1 = C2V2 una sola vez; consulta la calculadora de diluciones. Una dilución seriada encadena varias.
¿Puedo pipetear volúmenes en mL rápidamente?
Para transferencias de 1 a 80 mL con pipetas serológicas, un pipeteador eléctrico agiliza el trabajo y evita pipetear con la boca.
¿Cómo preparo la solución madre?
Pesa el soluto con la calculadora de molaridad y una balanza analítica para masas pequeñas.
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